Почему может быть слишком высокая ошибка длины волны у УФ спектрофотометров? Почему спектрофотометр не проходит поверку? Почему спектрофотометр не проходит по фармакопейным и / или валидационным требованиям к точности шкалы длин волн? Разберемся в этой статье.
При поверке спектрофотометров в подавляющем большинстве случаев заявляется погрешность установки длины волны не более +- 1 нм. При квалификации / валидации по фармакопейной статье 2.2.25 устанавливается критерий +- 1 нм для УФ области (до 400 нм вкл.) и не более +- 3 нм для видимой области (более 400 нм не вкл.).
1. Выставлен слишком большой шаг сканирования спектра
При большом шаге сканирования спектра прибор пропускает большие интервалы длин волн (например, каждые 2 нм) и грубо объединяет полученные измеренные точки оптической плотности.
Из-за этого получаются «рубленные» спектры и максимум может попасть совсем не на то место, где он должен был бы быть. Признаком той же проблемы будут являться значения максимумов с подозрительно идентичными значениями в разных параллелях.
Эта характеристика может называться по разному: шаг сканирования, скорость сканирования или иначе. Это чисто программная настройка.
2. Выставлена слишком широкая щель
Широкая щель в монохроматоре приводит к низкой разрешающей способности. Низкая разрешающая способность приводит к «сливанию» пиков на спектре между собой, отчего если пик был не симметричный, то его максимум сместится вправо или влево.
Увеличьте разрешение / выставьте меньшую длину волны (не всегда наименьшую).
Эта характеристика далеко не всегда доступная к настройке в спектрофотометрах и может называться также по разному: разрешающая способность, ширина щели, ширина линии или иначе. Это аппаратная настройка прибора.
3. Некорректное обнуление прибора
Спектрофотометр должен быть обнулен:
- строго на тех же настройках, что и производится измерение;
- на действительно холостой пробе: для твердотельного светофильтра — это воздух, для жидкостного светофильтра — это холостой жидкостной светофильтр, для раствора — это растворитель в той же кювете. И никак иначе.
- на тех же включенных лампах, что и производится измерение.
4. Источник излучения не стабилизировался
Тут все понятно, не спешите. Дайте прибору хотя бы 30 мин на стабилизацию для наилучших результатов.
5. Некорректно идентифицированные максимумы поглощения
Приблизите очень сильно верхушки максимумов поглощения на спектре. Максимумы действительно совпадают с автоматически определенными максимумами?
Не редко ПО некорректно определяет максимумы и причина может быть столь прозаична.
6. Источник излучения вышел из строя
Такое бывает, особенно для дейтериевых ламп. Правда в данном случае обычно нарушаются и другие характеристики — хотя бы дрейф нуля.
Замените лампу, стабилизируйте 30 мин, повторите тест.
7. Ваш прибор не соответствует требованиям
К сожалению это очень распространенная проблема, несмотря на заявления производителей в спецификациях и наличием поверок. Особенно часто эта проблема встречается среди российских и белорусских спектрофотометров. Не редко проблема имеется в дешевых спектрофотометрах из Китая.
Технически, для спектрофотометра значительно сложнее обеспечить нужную точность в УФ области. Это обусловлена принципами работы монохроматора. Поэтому зачастую прибор выходит за границы допусков именно в области до 400 нм.
При этом, большинство твердотельных светофильтров позволяют тестировать при поверке точность длины волны где-то от 350 нм, что очевидно является недостаточным для подтверждения соответствия в диапазоне до 200 нм.
Для более представительного подтверждения соответствия шкалы длин волн используют:
- гольмиевые твердотельные светофильтры (первый пик обычно около 280 нм);
- гольмиевые жидкостные светофильтры или фармакопейный раствор перхлората гольмия (первый пик обычно около 240 нм);
- цериевые жидкостные светофильтры или фармакопейные раствор церия (первый пик обычно около 201 нм).
Обычно тестирование от 201 нм является избыточной задачей, т.к. сложно найти реальную задачу с такой длиной волны, но тестирование от 250 нм — более чем достаточно. Обычно на этих длинах волн действительно вскрываются проблемы с точностью длины волны, не обнаруживаемые при поверке, где используются твердотельные светофильтры от ~350 нм.
Гольмиевый жидкостной светофильтр соответствует, в том числе фармакопейным требованиям и имеет доказанный срок годности в 2 года.
Ранее также мы производили цериевые жидкостные светофильтры (от 201 нм), но они были сняты с производства в связи с отсутствием спроса. Если у вас есть высокая потребность именно в таких светофильтрах, обратитесь к нам, мы сможем изготовить вам их по индивидуальному заказу.
